一般描述

KAPA2G快速多重PCR试剂盒含有定向进化改造的二代(2G)酶。KAPA2G FAST HotStart®快速热启动DNA聚合酶是专为提高持续合成能力和速度而设计的抗体介导热启动酶，与野生型Taq聚合酶相比，其提供了更快的延伸速率。除速度外，KAPA2G快速聚合酶比竞争对手的酶具有更高的产量和灵敏度，从而可实现一致性更高的多重PCR。

KAPA2G快速热启动DNA聚合酶试剂盒设计用于快速PCR，与使用野生型Taq DNA聚合酶进行的常规PCR分析相比，总反应时间能够缩短20–70％。这可以在不牺牲反应性能的情况下实现，并且不需要专门的PCR耗材或热循环仪。

应用

KAPA2G 快速多重混合液已用于：

转基因生物的分型

微卫星扩增

病原体的分型和检测

用于单核苷酸多态性(SNP)基因分型的多个DNA片段的扩增

半定量PCR

三重PCR

生化/生理作用

KAPA2G快速DNA聚合酶产生的DNA片段与野生型Taq聚合酶的DNA片段有相同的表征，可用于测序、限制性酶切和克隆。 同野生型Taq聚合酶一样，KAPA2G快速聚合酶具有5′→3′聚合酶和5′→3′外切酶活性，但不具有3′→5′外切酶（校正）活性。KAPA2G快速聚合酶的保真度类似于Taq聚合酶；每1.7 x 105核苷酸的错配数约为1个。PCR产物是3′-dA尾的，可以克隆到TA克隆载体中。

特点和优势

提高灵敏度、特异性和产量

所有扩增子表示统一表示

具有困难、富含 GC 靶标的成功多重 PCR

在不影响性能的情况下提高速度

循环时间缩短 60%

延长时间低至 15 秒

临时速记：

KAPA2G 快速多重混合液包含工程 KAPA2G 快速热启动 DNA 聚合酶，用于快速有效的多重 PCR。

KAPA2G 快速多重混合液含有优化用于多重 PCR 的缓冲液，每种 dNTP 含量为 0.2 mM，MgCl 2 浓度为 3 mM（1倍）。

每个引物使用 0.2μM，每次反应使用 10-100ng 模板 DNA。

60°C 下退火 30 秒。

延长 15 秒，增加更长的扩增子和/或高度多重反应。

质量

每批 KAPA2G 快速热启动 DNA 聚合酶经确认含有 <2% 的污染蛋白（安捷伦蛋白质 230 分析）。KAPA2G 快速多重 PCR 试剂盒经过严格的质量控制测试，没有污染的外切和内切酶活性，满足 DNA 污染水平的严格要求。

制备说明

使用前务必确保产品已经完全解冻和混合。试剂可储存在4℃条件下，以供短期使用（最长1个月）。返回 -20°C 条件进行长期储存。如果 ReadyMix 经过小心处理且未被污染，试剂盒在室温下放置短时间（最长3天）预计不会受到损害。不建议在室温和 4°C 条件下长期储存。请注意，储存在-20℃以上条件下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解，因此储存在这种温度条件下的风险由用户自行承担。